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紫外分光光度法測定梔子中西紅花苷的含量

更新時間：2018-10-29 點擊次數：3301

：利用紫外分光光度法測定梔子中西紅花苷的含量。方法：西紅花苷線性關系分析及該方法的精密度、重現性、穩定性和回收率考察。結果：梔子中西紅花苷的平均含量為0.928%，RSD（%）0.816。結論：該方法具有較好的線性關系，精密度、重現性、穩定性和回收率都符合要求（RSD＜3%）；此法可以作為梔子特征成分檢驗的依據，為其質量評價提供前期探索。

梔子，是屬于茜草科植物梔子的果實。屬于藥食兩用的資源，同時具有護肝、利膽、降壓、鎮靜、止血、消腫、瀉火除煩、清熱利尿、涼血解毒等諸多作用功效[1]。梔子中富含西紅花苷。梔子的化學成分比較復雜，達到了一百多種[2]。西紅花苷的外觀為呈紅棕色的粉狀物，是一類相對比較特殊的水溶性胡蘿卜素，同時充當著梔子中色素的主要成分，是梔子中的主要成分之一[3-4]。本研究旨在通過使用紫外分光光度法，研究并測定梔子中西紅花苷的含量。由于在梔子中，相對于西紅花苷 - I 的含量，西紅花苷 - II，西紅花苷 - III 和西紅花苷衍生物的含量極低。所以使用西紅花苷 - I 作為標品且將檢測結果近似作為西紅花苷的含量。

1.2 樣品制備稱取 2kg梔子，使用中藥切片機將其粉碎（60 目），加入 12L 70%vol 乙醇，在旋轉蒸發儀中，以水浴溫度為 55℃為條件，旋轉攪拌 2h，過濾后得到梔子乙醇溶液樣品 9.8L。 2 結果與分析 2.1 標準曲線的的繪制使用電子天平精密稱取標品西紅花苷 - I10mg，置于干燥的 100mL容量瓶中，使用體積分數為 50%的甲醇溶液定容，將其充分搖勻，配制成 100ppm的西紅花苷 - I 標準液。用移液槍，精密吸取甲醇溶液 1.25mL，西紅花苷 - I 標準液 0.25mL、1.25mL、2.5mL、5mL、10mL, 并且分別都注入到一組 25mL的干燥的容量瓶中。緊接著使用體積分數為 50%的甲醇溶液定容，再次進行充分搖勻。這就配制好了 1mg/L、 5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L的西紅花苷 - I 標準液。取配制好的西紅花苷 - I 系列標準溶液，在波長 440nm 西紅花苷 - I 的大吸收波長處，逐一使用紫外分光光度計檢測，以檢測數據吸光度為縱坐標，標準溶液濃度（mg/L）為橫坐標，繪制出了標準曲線。

繪制出西紅花苷 - I 標準曲線如圖 2- 1 線性關系良好，可以將其作為定量測定西紅花苷 - I 含量的標準曲線。并且由此得出了西紅花苷 - I 的標準曲線方程為 Y ＝ 0.1446X+0.0551， R2=0.9998， R2→1，說明兩個變量之間存在線性關系，可以作為本試驗的標準曲線。 2.2 紫外分光光度法測定樣品精密度、重復性、穩定性和回收率 2.2.1 精密度試驗取 1 份西紅花苷 - I 樣品，使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍，使用紫外分光光度計重復檢測 5 次，結果見表 2。由表 2 可知，西紅花苷 - I 含量 RSD為 1.275%（n=5）。其 RSD值小于 2%。結果表明儀器的精密度良好。

取 1 份西紅花苷 - I 樣品，使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍，將其放置于 4℃避光保存，分別于 0、2h、4h、8h、16h、24h 使用紫外分光光度計進行檢測，結果見表 4。由表 4 可知，西紅花苷 - I 含量 RSD為 1.629%為（n=6）。其 RSD值小于 2%。結果表明試驗的穩定性良好。

2.2.4 回收率試驗量取 3mL樣品 3 份，使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍，并配制20mg/L,40mg/L，60mg/L 的西紅花苷 - I 標準液各 2mL，加入樣品，并使用紫外分光光度計進行檢測，結果見表 5。由表 5 可知，西紅花苷 - I 的平均回收率為 99.05%，RSD 為 0.66%（n=3）。

3 結論通過一系列試驗，確定了西紅花苷 -I 標準曲線，且線性關系良好，可以使用。并且進行了紫外分光光度法的精密度、重復性、穩定性和回收率試驗，均符合要求，說明紫外分光光度法這一方法可以作為試驗方法使用。使用該方法在波長 440nm 下，也就是西紅花苷 -I 的大吸收波長處,測得樣品在使用 50%的甲醇溶液稀釋 100 倍后吸光度為 2.975，使用西紅花苷 -I 標準曲線得出梔子中西紅花苷 -I 的含量為 1894.81mg/L。樣品總體積為 9.8L，使用梔子 2kg，可得，梔子中西紅花苷的平均含量為 0.928%。

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